STRATEGIA WYKORZYSTUJĄCA PCR
I HOMOLOGICZNĄ REKOMBINACJĘ
DO WPROWADZANIA MUTACJI CHROMOSOMALNYCH
U BAKTERII RODZAJU STREPTOMYCES
Beata Ruban-Ośmiałowskala, Bertolt
Gust2,3, Keith
Chater3, Dagmara
Jakimowicz3
Jolanta Zakrzewska-Czerwińskalb
1Instytut Immunologii i Terapii Doświadczalnej im. Ludwika Hirszfelda, Polska Akademia Nauk
ul. Rudolfa Weigla 12, 52-431 Wrocław, abeataruban@immuno.iitd.pan.wroc.pl,
bzakrzew@immuno.iitd.pan.wroc.pl
2Pharmazeutisches Institut, Universitaet Tuebingen, Auf der Morgenstelle 8, 72076
Tuebingen, Germany, bertolt.gust@uni-tuebingen.de
3John Innes Centre, Norwich Research Park, Colney, Norwich NR4 7UH, UK
dagmara.jakimowicz@bbsrc.ac.uk, chater@bbsrc.ac.uk
Wpłynęło w listopadzie 2004
1. Wprowadzenie. 2. Systemy ,,hiper-rekombinacji": ET-klonowanie i
l
Red. 3. Zastosowanie systemu l
Red do wprowadzania zmian w chromosomie
Streptomyces. 4. Podsumowanie
Use of PCR and homologous recombination to introduce chromosomal mutations in
Streptomyces
Abstract: We present application of
l
Red recombination system for use in Streptomyces. The strategy allows to introduce different changes in Streptomyces chromosome including gene disruption, in-frame deletion, point mutations, promoter replacement, gene
fusions, and introduction of cluster of genes encoding biosynthesis of antibiotics. Presented strategy enables to manipulate Streptomyces DNA more rapidly and precisely than using traditional
techniques.
1. Introduction. 2. Hyper recombination systems: ET-cloning and
l
Red. 3. Use of the l Red system to introduce changes in
Streptomyces chromosome. 4. Conclusions
Słowa
kluczowe: Streptomyces, ET-klonowanie, l
Red system
Key words: Streptomyces, ET-cloning, l
Red system
|